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技術文章
2016-318
首先引物與模板的序列要緊密互補，其次引物不能在模板的非目的位點引發DNA聚合反應(即錯配)，再次引物與引物之間避免形成穩定的二聚體或發夾結構。引物設計應注意如下要點：1.引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp。2.引物序列在模板內應當沒有相似性較高，尤其是3’端相似性較高的序列，否則容易導致錯配。引物3’端出現3個以上的連續堿基，如GGG或CCC，也會使錯誤引發機率增加。3.引物3’端的末位堿基對Taq酶的DNA合成效率有較大的影響。不同的末位堿基在錯配位置導...
查看更多2016-318
蠕動泵引起這種現象的主要原因是系統內存在氣泡。此時需要仔細檢查輸液管與泵頭下閥是否擰緊，四氟管有無裂紋等，因為液體在流動時，在流經處產生微小的負壓，空氣會進入系統。當檢查完確認以后，將放空閥逆時針旋轉一圈左右后，用手按住運行鍵，此時，泵以zui高的流速從排空閥流出，氣泡隨之流出。當泵頭經過清洗后，或者更換流動相時，必須要經過這一相操作。此法效果不佳時，可以將主泵頭上閥的壓帽松開一點(約三分之一圈左右)存在單向閥內的氣泡就可以排除。當儀器是新購買或較長時間沒有使用，有時也會出現...
查看更多2016-317
蠕動泵的原理簡介：蠕動泵由于輸出的流量非常穩定因此又叫恒流泵，由于蠕動泵是靠擠壓軟管而達到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動泵的機械原理十分簡單。它是由轉輪擠壓著泵管并轉動從而推動管內的流體向前移動從而產生流體流動的，就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣，隨著手指的移動，管內形成負壓，液體隨之流動。蠕動泵這種產品由于具有恒流泵功能和潔凈操控方便等多種功能，因此在各種行業都有著廣泛的應用。生物醫藥溶劑、酸、堿、植物提煉液、軟膏、血漿石油、化工酸、堿、溶劑、懸浮物、分散體系...
查看更多2016-317
旋轉蒸發儀是實驗室和科研機構常用的儀器設備，下面我們就來了解一下旋轉蒸發儀的結構和工作原理是怎樣的。旋轉蒸發儀結構原理：結構：蒸餾燒瓶是一個帶有標準磨口接口的茄形或圓底燒瓶，通過一高度回流蛇形冷凝管與減壓泵相連，回流冷凝管另一開口與帶有磨口的接收燒瓶相連，用于接收被蒸發的有機溶劑。在冷凝管與減壓泵之間有一三通活塞，當體系與大氣相通時，可以將蒸餾燒瓶，接液燒瓶取下，轉移溶劑，當體系與減壓泵相通時，則體系應處于減壓狀態。使用時，應先減壓，再開動電動機轉動蒸餾燒瓶，結束時，應先停機...
查看更多2016-316
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現為細帶，為發散狀；如果目的擴增產物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低引物量。2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點，條帶清晰，但如果擴增產物小于100bp時，產物與引物二聚體就不好分別了，建議采用DNA聚丙烯酰胺電泳（不是蛋白質的SDS聚丙烯酰胺電泳）；如果引物二聚體在優化復性溫度后仍然嚴重影響目的產物的擴增，優先考慮更換引物設計（因為引物合成的成本...
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