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修飾肽純化的一般目標和方法首先,自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如:勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜(capturechromatography),主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質,此步zui關心的是流速和載量,常采用高載量、快流速凝膠。經過濃縮的部分純化的樣品進行中級色譜(intermediatechromatography),目的是去除較難去除的雜質,此步zui關心的是分辨率,常采用高分辨率的細顆粒凝膠...
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這個問題是常見的問題,就是一個PCR實驗一直都做得很好,停一段時間后再做就不行了。一通亂找原因后還是不行,很痛苦!找問題要從大到?。?、PCR擴增體系問題用其他正在進行的且擴增正常的模板和引物證明PCR擴增體系沒有問題,即PCR反應混合物、水、取液器、PCR儀、操作等都是好的(陽性對照)2、引物問題用以前擴增產物做模板(稀釋50倍),證明引物沒有問題3、只是模板問題了。因為樣本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是樣本中的抑制物過多(新鮮時沒有溶出來)。不要靠運氣找問...
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如今質粒純化不再是什么難題,那么做了這么次質粒抽提的你了解質粒純化的原理嗎?你知道哪些步驟對質粒純化的成功起著關鍵作用嗎?QIAGEN質粒抽提簡單原理:在堿性條件下裂解細菌之后,將裂解液以的鹽濃度加入QIAGEN-tip當中。質粒DNA將發生選擇性的結合而從RNA、蛋白質及其他細胞污染物中被分離出來。1、制備細胞裂解產物細胞產率很大程度上依賴于細胞裂解質量。因此制備澄清的細胞裂解產物是QIAGEN純化方案中的重要一環,QIAGEN已經仔細針對*的裂解條件進行了相關的專業設計。...
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凝膠成像系統的基本骨包含:CCD相機,暗室和分析軟件。不過其功能不僅于對瓊脂糠凝膠進行成像,現在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應用。在WesternBlot方面,高性能的CCD分子成像系統能與膠片媲美。CCD是電荷耦合器件(ChargeCoupledDevice)的英文名稱縮寫,是一種光電轉換器件。是凝膠圖像系統的核心部件。絕大多數對數碼相機都有一定的了解,不少人還是這方面的專家。有人把數碼相機的像素看得很重,但比較之后發現,有些400...
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